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原位定量检测蛋白质怎样的？
1、紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。
2、ph小于pi时蛋白质带正电，ph大于pi时蛋白质带负电。不同蛋白质等电点的蛋白质在同一个溶液中，表面电荷情况不同。离子交换就是利用不同蛋白质在同一溶液中表面电荷的差异来实现分离的。
3、由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。
4、蛋白质含量测定方法：紫外分光光度法蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值，在一定的范围内，蛋白质溶液的吸光值与其浓度成正比，可作定量测定。
5、蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。从而显得结果很不稳定。蛋白质直接定量方法，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。
PCR阴性对照始终有条带
提高退火温度，或重新设计引物，或者是阴性对照被污染，当然还有其它好多小原因，要是还没解决，请细说并追问。
这种情况很常见，也就是常说的阴性对照出问题。从两方面考虑，首先可能是做PCR的试剂用品有污染，其次可能是PCR过程中由于汽溶胶污染而造成。
说明引物有非特异性扩增。所以，当你的样品中出现一模一样的条带的时候，要小心了，说明这条带可能是非特异性扩增引起的。
这个是分子实验室常见问题，有人说是由于气溶胶引起的假阳性。首先要防止污染，其次要优化PCR体系及反应程序。
阳性对照,阴性对照等等什么意思定量PCR的定量原
生物实验中的阴性对照排除操作或试剂的问题引起的假阳性；阳性对照排除操作或含量过低引起的假阴性。阴性对照（negative control）和阳性对照（positive control）是针对“预期结果”而说的。-定量pcr中阴性对照有数据怎么办
阴性对照是用来监测实验中的一些变量的，比如生物实验中的pcr，需要监测引物特异性，可能会使用其他理论不应有扩增片段产生的模版进行验证。空白对照，用来检查实验条件本身是否有问题。
但扩出了内参，就说明不是模板的问题。阳性对照就是你的实验应该出现的结果，就是用你的结果和阳性对照对比用。阴性对照就是本底，起排除干扰的作用。关于实验原理的问题，建议看《分子生物学实验指南》。
阴性对照排除操作或试剂的问题引起的假阳性。阳性对照排除操作或含量过低引起的假阴性。一般来说，阳性（positive）代表有病或者有病毒，阴性（negative）代表正常。
阳性对照的目的是排除假阴性，阳性对照就是一个确定肯定已知是阳性的东西，如果结果出来这个样本测不出阳性反应，说明实验有问题。
阴性对照和阳性对照是针对“预期结果”而说的。凡是肯定出现预期结果的组，为阳性对照组。凡是肯定不会出现预期结果的组，为阴性对照组。实验组(experimental group) 是指随机选择的实验对象的子集。-定量pcr中阴性对照有数据怎么办
定量PCR阴性对照用什么水
1、另外你阴性对照加的是水，那么说明你做梯度稀释的时候用的也是灭菌水，这个做荧光定量试验是很不规范的，建议用专门的荧光定量稀释液去做。
2、阴性对照：无菌水（标本RNA提取时，跟标本同时提取无菌水。
3、无酶水(dnase/rnase-free ddH2O)。
4、两种都可以，看具体实验而定。一般而言常规pcr引物分两个浓度，一个是高浓度储存液，它是使用浓度的10x，高浓度储备引物用TE溶解；使用浓度的引物用灭菌的ddH2O稀释或溶解。
荧光pcr阴性对照也有峰,怎么了?
1、而阴性对照有目的峰那可能就是模板污染，注意实验操作等避免模板污染。
2、可能有三种原因：一，pcr产物不纯，电泳条带单一并不一定就说明没有非特异性扩增，也可能非特异性扩增产物与目标产物size相近，或浓度很低。
3、因为PCR测序一般使用的都是PCR扩增引物，如果引物本身不纯，测序结果会出现双峰。所以我们测序的引物一般要求都是要经过PAGE纯化的；测序样品序列中存在如重复序列，poly结构，发夹结构等复杂结构导致测序信号出现乱峰。-定量pcr中阴性对照有数据怎么办
4、你说的出现的峰是荧光性号对温度求导后得到的曲线图，出现峰是因为在接近Tm值的位置荧光性号下降的斜率很快导致在对温度求导后出现峰。出现单峰说明没有非特异性的结合和引物二聚体的产生。
5、戴好口罩手套，仔细着点。你可以看看溶解曲线的图，只要那张图没有起峰的话，就应该不是水中有污染；如果有峰，且温度非常低，可能是引物二聚体；如果是正儿八经的峰，那就是污染了，做的时候小心些。
6、如果你是想克隆一个基因或者一个基因片段，那么没有关系，把RT-PCR扩增的片断纯化后装到任何一个载体里面，转化大肠杆菌，获得阳性克隆。
