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生物方面问题,细胞培养液中加的双抗怎么配
双抗就是青链霉素混合液,青链霉素混合液(100X)(Penicillin-StreptomycinSolution)双抗,是专门用于细胞培养的,可以直接添加到细胞培养液内。青霉素-链霉素溶液(100X)中,青霉素的含量为10000U/ml,链霉素的含量为10mg/ml。
自己配就行,一般1升的培养基加0.1g的青霉素和0.1g的链霉素(混合好了在加到培养基里),如果图省事的话没买也可以。
一般青霉素的终浓度为100ug/ml,链霉素为50ug/ml, 配置贮存液的浓度:青霉素100mg/ml,链霉素50mg/ml,每100ml培养基中加100ul贮存液。 多少万单位你不用理,只按照质量浓度配置就可以了。-ecm培养液怎么加其他的东西
为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当抗菌素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。
软琼脂克隆形成实验加药处理怎么做
将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片,用肉眼直接计数克隆,或在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率= (克隆数/接种细胞数)×100%。
软琼脂克隆形成实验,已观察到集落形成,欲染色后拍照。用纯酒精配制0.1%结晶紫溶液,室温下染色20分钟后可见琼脂呈深紫色;用水洗脱,频繁换液,室温,摇床,半小时后洗脱不明显。
软琼脂培养克隆形成试验基本步骤:(1)取对数生长期细胞,用0.25%胰蛋白酶消化并轻轻吹打,使之成为单细胞,作活细胞计数,用含20%胎牛血清的DMEM培养液调整细胞密度至1×106细胞/L。然后根据实验要求作梯度倍数稀释。-ecm培养液怎么加其他的东西
琼脂雕制作方法:将琼脂用水放在火上熬化倒入模具冷却即可。(琼脂适当的稠一些 出来的琼脂雕就硬一些 反之就软一些,模具开口处可以用保鲜膜包紧,也可用胶带粘上。
ECM培养基培养HMEC-1细胞,平时培养基里加了生长因子,那么冻存的时候怎么...
生长因子并不是所有微生物培养基中都需要加的,只有少数营养要求特殊的微生物才需要加。所为生长因子是指微生物生长过程中必须的,某些细菌不能合成的,必须由外界直接提供的某些成分。
待细胞生长至可传代的密度,即可准备冻存。 消化细胞,取少量细胞悬液计数。细胞悬液经250 g离心4 min。 离心后去除上清,用适量4℃预冷的冻存液重悬细胞。将细胞按比例或数量分装至冻存管中。
生长因子是具有刺激细胞生长活性的细胞因子,一类通过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合,调节细胞生长与其他细胞功能等多效应的多肽类物质。用于细胞、组织培养基。
如果非要对你的问题做一个答复的话只能说是合成培养基需加生长因子。因为天然培养基和半合成培养基都有一些成分不确定的有机物,其中一般含有微生物生长所需的某些生长因子。
细胞培养基主要是考虑给予细胞生长以适合的条件,营养、pH、生长因子等,血清的优劣有很大影响;而细胞冻存液首先关键在于冷冻保护剂,一般常用DMSO此类渗透性保护剂,其浓度比和冻存方法是关键。