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gus染色原理
1、gus染色要洗脱是为了与实验组形成对照。洗脱的操作步骤及原理是:将材料转入无水乙醇或80%丙酮中脱色2-3次,至阴性对照材料为白色。GUS染色阳性的蓝色斑点很稳定,在酒精中不褪色。
2、Gus 基因存在于某些细菌体内,编码β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS),该酶是一种水解酶,能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解。
3、3)脱色:将染色好的材料转入70%酒精中脱色2-3次,直至阴性对照材料变为白色。GUS染色阳性的蓝色斑点非常稳定,不会被酒精脱色。
4、一,色调不均的原因。色调不均是由于染料吸附量的不同而引起的,因此吸附染料较多的部位看起来较深,相反,难以吸附的部位看起来较浅。影响吸附量的主要原因是铝阳极氧化条件,染色条件以及混合染料的染色速度。-x-gluc用什么溶解
5、这是由其初始产物的氧化供体形成的靛蓝染料,在GUS活性部分或部位呈蓝色,肉眼或显微镜下可见,根据染色GUS活性可在一定程度上反映出来。
低熔点琼脂糖用什么试剂溶解
1、溶于热水,不溶于冷水、有机溶剂。适当浓度的水溶液,遇冷凝结成胶状。在低pH时,凝胶强度下降,甚至不能成胶状,冰冻的凝胶解冻后凝胶形状会破坏,但加热溶解放冷后可重新形成原来形状。
2、1倍或者0.5倍的TBE溶解,TBE成分为:Tris、硼酸、EDTA的缩写。TBE作为电泳缓冲液,其中的离子可以导电。并且TE作为DNA的储存液,可以保证DNA免受DNA酶的降解,其中的离子也可以稳定DNA的存在。-x-gluc用什么溶解
3、Tris-HCl (pH4, 6, 0)组份浓度:1 M Tris-HCl 配制量:1 L 配制方法:称量121 g Tris置于1 L烧杯中。 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。 加入浓盐酸调节所需要的pH值。-x-gluc用什么溶解
在做蓝白斑筛选,要溶解X-Gal但是没有DMF,能用什么代替DMF?看见有说...
则不能产生β-半乳糖苷酶,因此不能分解X-gal产生蓝色底物,所在的菌落呈现白色(相对蓝色),这样就能完美实现蓝白斑的筛选了。
可将50ul的X-Gal和100 ulIPTG贮液直接加入到平板中,扩散到整个平板中,在37oC保温30分钟使液体扩散。IPTG溶于水中,贮液浓度为100mM,X- Gal溶于DMF,贮液浓度为50mg/ml。-x-gluc用什么溶解
将目的基因插入LacZ靠近5‘端有多克隆位点,是否成功插入有待蓝白斑筛选鉴定。
DMF可溶解什么样的有机物,请说清化学反应的原理 异构化是改变化合物的结构而分子量不变的过程。一般指有机化合物分子中原子或基团的位置的改变。常在催化剂的存在下进行。主要有气相法和液相法两种。
首先把IPTG配制成24 mg/ml(100 mM)的水溶液,并进行过滤除菌后保存。
蓝白斑筛选是一种基因工程常用的细菌重组质粒的筛选方法。野生型大肠杆菌(E.Coli)产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。-x-gluc用什么溶解