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PCR仪器的使用方法
方法：将DNA加热（至90~95℃）变性，将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板。则是令Primers于一定的温度下（冷却至55~60℃）附着于模板DNA两端。
PCR反应体系的配置方式有时也会影响反应的正常进行。常规方法与其它酶学反应一样，在最后加入DNA聚合酶。早期的PCR仪没有带加热的盖子，要求在反应液上覆盖一层矿物油，防止水分蒸发。
从冰箱取出所需试剂、样品，放置在冰盒上，解冻试剂、样品，点动离心。 取所需数量小EP管（200 μl），按附录所示配制反应体系。 加完所有试剂和样品后，点动离心，去除管内气泡。
逆转录体系能不能是30ul
1、全在80以下，你扩出来的东西多半只是引物，你跑定量的时候有做NTC的孔吗，如果有做，可以对照NTC组和加了模板的组，溶解峰还是一样的话，那你扩出来的产物100%是引物了。
2、一般A260/ A280比值在8~0之间，可以满足实验要求。
3、首先是确定的总体积，可以选择10ul，20ul，50ul等。其次是根据mix，算出总体积中mix使用的体积。根据自己提取或者逆转录得到的DNA浓度，以及一次pcr反应所使用模板的量，计算出DNA的体积。-逆转录用什么仪器
进行逆转录实验是所用的引物一般有三种,oligo、基因特异性引物,还有一...
1、随机引物 适用于长的或具有发卡结构的RNA。适用于rRNA、mRNA、tRNA 等所有RNA的反转录反应。主要用于单一模板的RT-PCR反应。Oligo dT 适用于具有PolyA尾巴的RNA。
2、需要。合成cDNA的试剂盒一般提供随机引物。如果是要mRNA， 反转录就用poly-A引物。
3、需要_ǔRT primer可分为三类：oligo dT，随机引物以及基因特异性引物。Oligo dT引物之所以应用范围更加广泛，是因为可由此获得mRNA的全长拷贝。
4、通常情况下，是将 oligo(dT) 引物和随机引物进行混合使用。这些引物退火至模板 mRNA 链，并提供给逆转录酶一个用于合成的起点位置。三种引物的特征和优缺点比较如下：逆转录酶是利用 RNA 合成 DNA 的一种酶。-逆转录用什么仪器
5、逆转录的引物有3种，分别是随机*聚体（radom*），寡聚脱氧腺嘌呤（oligo dT），以及特异性引物。如果是前两者作为引物，它们是能在任意的RNA（oligo dt只能在mRNA上）连接，并且合成相对应的cDNA。-逆转录用什么仪器
