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做免疫荧光用什么耗材

做免疫荧光用什么耗材(免疫荧光需要哪些试剂)

admin admin 发表于2023-04-27 16:04:08 浏览63 评论0

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组织免疫荧光染色必需用Triton吗

1、免疫荧光染色也称FISH,主要是用于表皮生长因子2(HER-2)的表达,可以判定阳性还是阴性,丙酮作用是溶解膜磷脂。

2、注:4%甲醛,0.2%Triton,5%BSA均用1×PBS稀释。细胞爬片的免疫荧光步骤基本一致: 取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。

3、前者是比较温柔的处理,但是对于核内抗原可能无效,需要用到Triton。使用皂角苷进行通透时,要注意它会引起细胞膜的可逆性通透,也就是除了在通透初期,在每个抗体孵育环节都需要进行通透。

4、我对内质网上膜蛋白的染色没有经验,建议楼主参考文献,或者请抗体的生产商给出相应的protocol。因为穿透试剂本身会破坏膜结构,所以内质网膜蛋白染色貌似难度比较大。穿透的染色中,固定也很重要,楼主看有没有漏掉这一步。-做免疫荧光用什么耗材

免疫荧光层析法可以用手电筒照吗

1、可以。免疫荧光层析法可以用手电筒照,但需要借助类似TANK007UV340便携式紫外线手电这种显色设备。

2、荧光免疫层析法用便携式紫外线灯或专业紫外线试剂检测手电。荧光层析法需要借助专业免疫荧光分析仪。

3、不准。荧光免疫层析法抗原检测试剂盒需要使用一种特殊波段的紫外线灯(俗称紫外线试剂检测灯或叫荧光显色灯),而非蓝光手电筒,所以不准。

细胞凋亡免疫荧光用什么hoechst33342还是tunel

将Annexin-V进行荧光素(FITC、PE)或biotin标记,以标记了的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。

hoechst法看凋亡,主要是看sub-G1期的细胞数量。原理就是凋亡的细胞,由于DNA正在降解,所以含量比正常细胞要少。

如果细胞量很少,还可在分离提纯DNA后,用32P-ATP和脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)使DNA标记,然后进行电泳和放射自显影,观察凋亡细胞中DNA ladder的形成。

Hoechst 33258,也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式为:C25H24N6O·3HCl,分子量为5388。两种染料都是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。-做免疫荧光用什么耗材