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流式annexinfitcpi双染法测凋亡各个象限代表什么状态的细胞
1、Q1:(AnnexinV-FITC)-/PI+,此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中,甚至机械损伤的细胞也包含其中。Q2:(AnnexinV+FITC)+/PI+,此区域的细胞为晚期凋亡细胞。
2、理论上无染色的细胞室健康细胞,annexin单染的是早期凋亡,双染是中期,PI单染是坏死细胞。其实这个检测的结果是很不准确的,已经逐渐被弃用,而换用其他更加特异敏感的方法,比如活化的caspase等等。
3、流式图四个象限看凋亡:在二维散点图上,PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。一般认为PI单染的细胞是已经死亡的细胞,annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞,而双染是凋亡中期的。
如何用流式检测细胞凋亡
1、流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ,它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine, PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的(如下图3)。-流式检测带gfp细胞凋亡图怎么看
2、检测凋亡的流式方法很多,就算是BD的机子,型号也很多,所以操作差别很大。不过原则都是一样的。
3、将Annexin-V进行荧光素(FITC、PE)或biotin标记,以标记了的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
4、流式细胞仪和显微镜比较像,但能够对大量的单个细胞利用一组参数进行高通量的自动量化。固体组织需要在检测前制备成单细胞的悬浮液。
细胞活性氧ROS检测找哪家
活性氧检测试剂盒是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。-流式检测带gfp细胞凋亡图怎么看
DCF应该指的是测量细胞内活性氧ROS含量的一个检测试剂,2’,7’__dichlorodihydrofluorescein。CM-H2DCFDA在细胞内水解成DCFH,DCFH被胞内的氧化剂氧化成高荧光强度的DCF,用于检测ROS_的生成。-流式检测带gfp细胞凋亡图怎么看
也就是说,氧气会在细胞水平上损伤我们的身体,这个损伤,主要由我们体内的活性氧(ROS)来进行。从来源来划分,活性氧(ROS)有两种,一种是我们吸入的空气在体内的衍化物,另一种是自然界中存在的活性氧(ROS)。-流式检测带gfp细胞凋亡图怎么看
流式细胞仪的象限如何观察?
左下象限(LL)为双阴性细胞,左上象限(UL)为Y轴阳性细胞(CD19 PE),左下象限(LR)为X轴阳性细胞(CD3 FITC),右上象限(UR)为双阳性细胞(CD19+/CD3+)。
流式图四个象限看凋亡:在二维散点图上,PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。一般认为PI单染的细胞是已经死亡的细胞,annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞,而双染是凋亡中期的。
左下为正常细胞,左上为坏死细胞;右上为晚期凋亡细胞,右下为早期凋亡细胞。检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。-流式检测带gfp细胞凋亡图怎么看
左下象限,是两种目标抗原都没有表达(染色阴性)。右上象限,是两种都有表达(双阳性)。
这种立体图以点图为显示方式,同样可以作全方位旋转以便仔细观察。
左上象限为坏死细胞,左下象限为正常细胞,右上象限为早期凋亡细胞,右下象限为晚期凋亡细胞。
流式图四个象限怎么看凋亡
1、Q1:(AnnexinV-FITC)-/PI+,此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中,甚至机械损伤的细胞也包含其中。Q2: (AnnexinV+FITC)+/PI+,此区域的细胞为晚期凋亡细胞。-流式检测带gfp细胞凋亡图怎么看
2、左上/P2-Q1:坏死细胞;右上/P2-Q2:晚期凋亡细胞;右下/P2-Q3:早期凋亡;左下/P2-Q4:未发生凋亡的细胞。胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。-流式检测带gfp细胞凋亡图怎么看
3、二维点图以双参数显示结果,每个点表示一个或多个细胞。图5-6为阴性对照图,用于设定阴性对照边界,全图划分为四个象限,以区分阴性细胞、单阳性细胞以及双阳性细胞。
4、如下图所示:细胞可以分为4个象限:图4:4个象限的细胞分布图 举例:如常用于研究药物或者基因等对细胞凋亡的影响。
5、左下为正常细胞,左上为坏死细胞;右上为晚期凋亡细胞,右下为早期凋亡细胞。检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。-流式检测带gfp细胞凋亡图怎么看
6、左上象限为坏死细胞,左下象限为正常细胞,右上象限为早期凋亡细胞,右下象限为晚期凋亡细胞。